腦切片是神經(jīng)科學(xué)研究中的重要技術(shù)，指將大腦組織切割成薄片，用于觀察細胞結(jié)構(gòu)、神經(jīng)連接或病理變化。核心步驟包括取材、固定、切片、染色和成像，常用方法有冷凍切片和石蠟切片，應(yīng)用涵蓋疾病診斷、腦功能研究及藥物開發(fā)。

小鼠小腦切片取自雄性和雌性正常型及Ube3a?/? P9-P11小鼠幼崽，如前所述。簡而言之，小腦矢狀面切片（300-μm厚）是在MacIlwain組織切割器上切割的，并轉(zhuǎn)移到具有0.4-μm孔徑的30-mm Millipore培養(yǎng)插孔的膜上。切片在六孔板中保持培養(yǎng)，培養(yǎng)基為1ml [MEM（Thermo Fisher Scientific, 32360-026）補充25%馬血清（Life Technologies, S-HS-EU-015），25%漢克平衡鹽溶液（Invitrogen, 14025092），1% P/S，1% Glutamax（Sigma, 35050-038），1.3%葡萄糖（Sigma, G8644）和1.1% 1M HEPES（Thermo Fisher Scientific, 15630-080），在37°C, 5%的CO2環(huán)境下培養(yǎng)。

為了清除巨噬細胞細胞，切片在分離后立即用荷蘭Liposoma品牌的氯膦酸鹽鹽脂質(zhì)體clodronateliposomes或空脂質(zhì)體（0.5 mg/ml, LIPOSOMA）處理24小時。然后通過在切片上方添加4×103 LPS（100 ng/µl, Sigma, 437627, 18小時）或IL4刺激（20 ng/µl, Peprotech, 214-14, 18小時）正常型或Ube3a?/? BMDMs的1.5 μl滴液直接補充切片，而不接觸切片。切片恢復(fù)2天后，采用溶血卵磷脂（0.5 mg/ml, Sigma, 62963）處理切片16小時以誘導(dǎo)去髓鞘化。隨后，切片被洗滌并在培養(yǎng)中保持6天，然后進行組織學(xué)和生化分析。

clodronateliposomes體外清除小鼠腦切片巨噬細胞解決方案：

1. 切片厚度：300μm

2. 濃度：0.5mg/ml

3. 用量：培養(yǎng)基體積1ml，清除劑濃度5mg/ml。即每孔1ml培養(yǎng)基加100ul清除劑clodroanteliposomes（Liposoma，C-005）

4. 時間：24h

clodronateliposomes體外清除小鼠腦切片巨噬細胞效果檢測：

如圖：巨噬細胞marker為F4/80，顯示為紅色。通過荷蘭Liposoma的Clodronateliposomes（C-005）處理后，腦切片上的巨噬細胞幾乎全部清除。

論文信息：

論文題目：UBE3A promotes foam cell formation and counters remyelination by targeting ABCA1 for proteasomal degradation

期刊名稱：Nature Communications

時間期卷：16, Article number: 8077 (2025)

在線時間：2025年8月29日

DOI：doi.org/10.1038/s41467-025-62053-w

產(chǎn)品信息：

貨號：CP-005-005

規(guī)格：5ml+5ml

品牌：Liposoma

產(chǎn)地：荷蘭

名稱：Clodronate Liposomes and Control Liposomes

辦事處：Target Technology(靶點科技)

Clodronate Liposomes氯膦酸鹽脂質(zhì)體清除泡沫巨噬細胞，泡沫巨噬細胞含有過量的細胞內(nèi)來源于髓鞘的脂質(zhì)，導(dǎo)致多發(fā)性硬化癥（MS）等神經(jīng)退行性疾病的病理。雖然對富含脂質(zhì)的結(jié)構(gòu)，如改良的脂蛋白和髓鞘的攝取，將巨噬細胞表型重塑為通常與組織修復(fù)和免疫抑制相關(guān)的表型，但這種解決疾病的表型僅是短暫的。我們和其他研究者發(fā)現(xiàn)，巨噬細胞中髓鞘來源脂質(zhì)的過度積累，尤其在衰老過程中，使泡沫細胞傾向于更具炎癥性和促進疾病的表型。這種有害表型的誘導(dǎo)與大腦修復(fù)模型中損傷恢復(fù)受損密切相關(guān)。從機制上講，細胞內(nèi)脂質(zhì)的新陳代謝失調(diào)，主要由于膽固醇外流減少，導(dǎo)致細胞脂質(zhì)含量失衡和有害泡沫巨噬細胞亞群的發(fā)展。荷蘭Liposoma巨噬細胞清除劑Clodronate Liposomes見刊于Nature Communications：氯膦酸鹽脂質(zhì)體clodronateliposomes體外清除腦切片Cerebellar brain slices 巨噬細胞。