由 Higgins & Anderson 于 1931 年建立,全球肝臟再生領(lǐng)域金標準經(jīng)典動物模型,也是NLRP3 inflammasome constrains liver regeneration through impairing MerTK-mediated macrophage efferocytosis這篇文獻使用的模型。
-中葉 + 左外側(cè)葉:合計70% 肝臟總質(zhì)量 → 手術(shù)切除此兩葉
-右葉 + 尾狀葉:剩余30% 肝組織,啟動全身級肝臟再生
業(yè)內(nèi)別稱:2/3 肝切除(two-thirds PHx),與 70% PHx 等價,文獻通用混用。
僅切除肝葉、不造成肝細胞壞死 / 炎癥損傷,無中毒、無缺血壞死,純粹通過肝質(zhì)量缺失觸發(fā)生理性肝臟再生,模擬臨床肝切除術(shù)后肝代償增生,排除毒素、炎癥壞死干擾,解析再生調(diào)控通路。
-品系:C57BL/6J 雄性小鼠(7~9 周齡,體重 22~26g)
-性別要求:優(yōu)先雄性;雌性小鼠肝細胞增殖顯著偏慢、再生周期延遲,機制實驗一般不用
-對照分組:Sham 假手術(shù)組(僅開腹、游離肝臟、不切肝葉、關(guān)腹)
•術(shù)前準備:禁食禁水 4~6h,異氟烷氣體麻醉、腹部備皮消毒
•開腹:劍突下腹正中縱切口(1~1.5cm),逐層切開皮膚、腹肌、腹膜,暴露肝臟
•游離肝韌帶,充分暴露中葉、左外側(cè)葉,注意保留膽囊、尾狀葉
•結(jié)扎切除:絲線緊貼肝蒂根部結(jié)扎中葉血管膽管→切除;同法結(jié)扎切除左外側(cè)葉
•關(guān)腹復(fù)蘇:逐層縫合腹膜、肌肉、皮膚,術(shù)后保溫墊復(fù)蘇,常規(guī)飼養(yǎng)
•啟動期(術(shù)后 0~24 h):損傷信號啟動、生長因子釋放、靜息肝細胞進入細胞周期(你文獻中NLRP3 早期高活化即在此階段)
•增殖高峰期(術(shù)后 2~4 d):肝細胞大量分裂增殖,肝重快速回升
•終止重塑期(術(shù)后 7~14 d):增殖停止、組織結(jié)構(gòu)修復(fù)、肝重恢復(fù)基線、再生終止

•肝臟再生分子機制:增殖通路、炎癥小體、巨噬細胞極化、胞葬作用(MerTK/efferocytosis)
•肝免疫微環(huán)境:枯否細胞(KC)、肝竇內(nèi)皮細胞(LSEC)、髓系細胞調(diào)控
•術(shù)后并發(fā)癥研究:肝切除術(shù)后肝功能衰竭(PHLF)干預(yù)靶點
•70% 肝切除瞬間觸發(fā)再生啟動,早期 NLRP3 炎癥小體自發(fā)活化,天然抑制再生;
•NLRP3 主要在 髓系巨噬細胞(KC)中發(fā)揮作用,肝細胞自身 NLRP3 無明顯影響。
•NLRP3 抑制 MerTK 介導(dǎo)的巨噬細胞胞葬,阻礙凋亡細胞清除、荷蘭Liposoma氯膦酸鹽脂質(zhì)體清除巨噬細胞延緩肝臟再生。
•MCC950(NLRP3 抑制劑)可逆轉(zhuǎn)高脂飲食小鼠 PHx 術(shù)后再生受損,對應(yīng)臨床轉(zhuǎn)化靶點。

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